Kibron DeltaPi四通道機(jī)型支持4個(gè)獨(dú)立測(cè)量通道同步開(kāi)展藥物?磷脂相互作用測(cè)試,每個(gè)通道擁有獨(dú)立的微天平傳感單元、獨(dú)立探針與樣品杯,硬件層面可以同時(shí)放置四種不同藥物體系,實(shí)現(xiàn)平行采集動(dòng)態(tài)界面張力數(shù)據(jù),縮短批量篩選實(shí)驗(yàn)周期,但存在幾項(xiàng)關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)約束,需要規(guī)避通道間交叉干擾。
硬件與實(shí)驗(yàn)?zāi)J剑耐ǖ栏髯元?dú)立采集張力隨時(shí)間變化的吸附動(dòng)力學(xué)曲線,適合對(duì)比不同藥物與磷脂單分子層、磷脂溶液的界面吸附行為。可以設(shè)置四種不同藥物濃度,或者四種不同藥物分子,亞相統(tǒng)一為磷脂緩沖體系,同步記錄吸附、置換帶來(lái)的張力變化。需要注意,四個(gè)樣品杯相互獨(dú)立,不存在液體互通,但是共享同一臺(tái)儀器環(huán)境,溫度、空氣濕度、環(huán)境震動(dòng)對(duì)全部通道同步產(chǎn)生影響。
實(shí)操關(guān)鍵控制點(diǎn),第一,探針質(zhì)控,四根鉑探針需要統(tǒng)一灼燒清洗,保證初始狀態(tài)一致,探針變形、局部污染會(huì)造成單通道數(shù)據(jù)異常,測(cè)試前統(tǒng)一做純水基線校驗(yàn)。第二,揮發(fā)與交叉氣相干擾,多個(gè)樣品同時(shí)孵育,揮發(fā)性藥物組分可以通過(guò)氣相擴(kuò)散,在相鄰樣品杯亞相發(fā)生交叉污染,揮發(fā)性強(qiáng)的藥物不適合四通道同步并行,優(yōu)先單通道分批測(cè)試。第三,液面高度校準(zhǔn),四個(gè)通道樣品杯液面高度盡量保持一致,液面高度差異會(huì)改變探針浸入條件,引入系統(tǒng)偏差。第四,設(shè)置通道內(nèi)空白對(duì)照,四通道排布建議包含空白磷脂亞相對(duì)照組,用來(lái)扣除磷脂自身界面吸附基線,區(qū)分藥物真實(shí)作用和磷脂本身動(dòng)力學(xué)變化。第五,參數(shù)統(tǒng)一,全部通道使用完全一致的浸入深度、采樣間隔、恒溫條件,保證四組數(shù)據(jù)具備橫向?qū)Ρ刃浴?
數(shù)據(jù)處理,軟件可以同時(shí)導(dǎo)出4條時(shí)序動(dòng)態(tài)張力曲線,導(dǎo)出CSV后在外部軟件做參數(shù)提取,對(duì)比平衡張力、吸附速率、張力變化幅度,評(píng)價(jià)不同藥物對(duì)磷脂界面膜的擾動(dòng)能力。不建議直接依靠軟件內(nèi)部簡(jiǎn)單繪圖完成全部對(duì)比,需要扣除空白磷脂基線之后再做差異分析。
局限性說(shuō)明,DeltaPi四通道不能做獨(dú)立亞相注射,外源藥物注射需要手動(dòng)加樣,無(wú)法實(shí)現(xiàn)通道獨(dú)立自動(dòng)進(jìn)樣;對(duì)于易揮發(fā)、易氣溶膠擴(kuò)散的藥物,四通道同步模式會(huì)存在氣相串?dāng)_風(fēng)險(xiǎn),該類樣品改為單通道依次測(cè)試。
論文寫(xiě)作,寫(xiě)明四通道同步測(cè)試模式,探針預(yù)處理、液面校準(zhǔn),說(shuō)明揮發(fā)性樣品存在氣相交叉干擾風(fēng)險(xiǎn),空白磷脂亞相同步設(shè)置,所有通道實(shí)驗(yàn)參數(shù)保持統(tǒng)一。審稿應(yīng)答重點(diǎn)解釋四通道硬件獨(dú)立但環(huán)境共享,區(qū)分液體直接交叉污染和氣相揮發(fā)間接干擾,說(shuō)明哪些場(chǎng)景適合并行,哪些場(chǎng)景改用單通道模式。
